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技術(shù)文章/ Technical Articles

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  • 2013

    5-27

    ELISA檢測技術(shù)是20世紀(jì)70年代發(fā)展起來的一種檢測技術(shù),因其具有敏感性高、特異性強、操作簡單等優(yōu)點,被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體的測定,為輔助研究診斷與生物科研起到了積極的推動作用。但ELISA測定中影響因素較多,操作過程中每個環(huán)節(jié)都會對試驗結(jié)果產(chǎn)生影響,出現(xiàn)錯誤的結(jié)果?,F(xiàn)對影響實驗結(jié)果的常見因素及相應(yīng)的控制方法分析探討如下:1試劑的因素1.1試劑的選擇試劑的選擇是保證血液檢測質(zhì)量的關(guān)鍵要素。雖然國家采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),但不同廠家的試劑在使用效果上仍...

  • 2013

    5-26

    對于實驗質(zhì)量管理來說的*要素是,選擇和執(zhí)行適當(dāng)?shù)馁|(zhì)量控制(internalqualitycontrol,IQC)程序,例如根據(jù)測定項目的質(zhì)量要求和方法特點選擇統(tǒng)計學(xué)標(biāo)準(zhǔn)、控制規(guī)則和質(zhì)控品的數(shù)目,并嚴(yán)格執(zhí)行IQC程序以提高IQC的質(zhì)量。室內(nèi)質(zhì)控方法很多,但酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)中仍主要采用Levey-Jennings質(zhì)控圖。筆者長期從事免疫學(xué)檢驗質(zhì)量管理工作。發(fā)現(xiàn)醫(yī)院、血站檢驗科在實際工作中存在一些比較普遍的問題或疑問。根據(jù)自身實踐經(jīng)驗,結(jié)合相關(guān)專著,簡要介紹如下,供實...

  • 2013

    5-26

    zui近,上海信帆生物科技有限公司在進行了一項大腸桿菌電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的實驗。實驗過程操作規(guī)范順利,得出的結(jié)果良好。實驗所需試劑:國產(chǎn)細(xì)胞菌株、培養(yǎng)基、10%甘油、DNA細(xì)胞*天:1.將適合菌株(如XL1-Blue,DH5α)置于LB或其他營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上,在37°C下過夜培養(yǎng)2.高溫滅菌大的離心瓶(250-500ml)以備第二天搖瓶用3.準(zhǔn)備幾瓶滅菌水(總量約1.5升),保存于冷凍室中以備第二天重懸浮細(xì)胞用第二天:4.轉(zhuǎn)移0.2-1ml過夜培養(yǎng)物至裝有500mlLB(或其...

  • 2013

    5-25

    中科院動物研究所、武漢大學(xué)的研究人員在11月26日的美國《國家科學(xué)院院刊》(PNAS)雜志上發(fā)表了一項科研成果,他們在新研究中發(fā)現(xiàn)了一種新型端粒和端粒酶相互作用蛋白,證實其具有解開端粒G-quadruplex,促進哺乳動物細(xì)胞中端粒延伸的功能。中科院動物研究所的譚錚(ZhengTan)研究員和武漢大學(xué)的趙勇(YongZhao)博士為這篇論文的共同通訊作者。前者的主要研究興趣是端粒功能與細(xì)胞衰老的機制,采用生物化學(xué),生物物理和細(xì)胞生物學(xué)的手段研究染色體端粒DNA結(jié)構(gòu)與功能,端粒...

  • 2013

    5-25

    美國SLAC國家加速實驗室的科學(xué)家們在實驗中揭示了攻擊一種常見胃部細(xì)菌——幽門螺旋桿菌(Helicobacterpylori)的潛在新途徑,這種細(xì)菌可以引起潰瘍,并可顯著提高形成胃癌的幾率。相關(guān)論文發(fā)表在12月9日的《自然》(Nature)雜志上。研究人員經(jīng)過五年的努力,利用來自SLAC斯坦福同步輻射光源SSRL(StanfordSynchrotronRadiationLightsource)獲得了這一突破性的成果。幽門螺旋桿菌是一種能夠生存在強胃酸環(huán)境下的頑強細(xì)菌。世界上有...

  • 2013

    5-24

    由監(jiān)督管理委員會組織實施的“P3和P4實驗室生物安全技術(shù)與應(yīng)用”(上海信帆生物)項目在2013年1月18日召開2012年度國家科學(xué)技術(shù)獎勵大會上獲得國家科技進步獎二等獎,這標(biāo)志著我國別實驗室生物安全技術(shù)取得重大突破。P3和P4實驗室是指從事高致病性病原微生物實驗活動的別生物安全實驗室,在烈性傳染病防治和生物反恐領(lǐng)域起關(guān)鍵作用。P4實驗室是世界上生物安全防護水平高、也是危險的實驗室,俗稱“魔鬼實驗室”,目前世界上只有美、俄、日、歐等少數(shù)發(fā)達(dá)國家和地區(qū)擁有。P3實驗室是從事高致病...

  • 2013

    5-23

    我是一個生物實驗室的研究員,人們想象中我們應(yīng)該是呆板木訥的形象,但是事實上我們也和其他80后一樣,是熱情開朗活潑的人。經(jīng)常出去活動,遇到很多朋友,詢問我的工作。zui多的問題,就是你們?yōu)槭裁匆眯∈髞碜鯡LISA試劑盒實驗?zāi)?,現(xiàn)在就將原因告訴大家。在哺乳類實驗動物中,由于小鼠體小,飼養(yǎng)管理方便,易于控制,生物試劑繁殖快,研究zui深,有明確的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn),已擁有大量的近交系、突變系和封閉群,因此在各種實驗研究中,用量zui大,用途zui多。大型的哺乳動物也是有的,但是要做到潔...

  • 2013

    5-23

    視神經(jīng)脊髓炎(neuromyelitisoptica,NMO)診斷目前主要依據(jù)2006年Wingerchuk修訂標(biāo)準(zhǔn):(1)兩個必要條件:視神經(jīng)炎和急性脊髓炎;(2)輔助條件:脊髓顯示T2信號病灶大于3個或3個以上椎體節(jié)段;腦部MRI不符合MS診斷標(biāo)準(zhǔn);血清NMO-IgG陽性。此標(biāo)準(zhǔn)長期以來作為NMO研究診斷的推薦標(biāo)準(zhǔn),在此標(biāo)準(zhǔn)的輔助診斷條件中提到了脊髓和腦部MRI的應(yīng)用,但是沒有進一步的詳細(xì)描述脊髓及腦部MRI的影像特點。因此,重視MRI在診斷NMO中的價值是非常必要的。在...

  • 2013

    5-22

    ELISA操作實驗中的樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水...

  • 2013

    5-20

    胎牛血清在使用過程中的常見問題1、FBS和FCS的區(qū)別?他們是對同一種血清產(chǎn)品的同樣確切的描述。2、我的FBS有沉淀物,他們是什么,怎么處理?沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清或者簡單的讓其沉淀在瓶低部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里即可。3、我的FBS部分解凍,該怎么辦?讓血清*解凍,輕輕旋轉(zhuǎn)血清瓶,然后重新冷凍血清。血清質(zhì)量不會受到影響。4、怎樣熱滅活血清?血清熱滅活是在56℃水浴,放置30分鐘。水位應(yīng)該高于血清水位。在熱滅活...

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